（EGFP saRNA试用装免费领）欧盟批准全球首-款自复制mRNA新冠疫苗，技术突破或推动基因治疗新浪潮

2025年2月14日，生物技术巨头CSL与自复制mRNA（saRNA）技术先驱Arcturus Therapeutics联合宣布，欧盟委员会（EC）正式批准其研发的自复制mRNA COVID-19疫苗KOSTAIVE^®（ARCT-154）上市，适用于18岁及以上的成年人。这是全球首-个获批的自复制mRNA疫苗，也是RNA疫苗研发与应用史上的重要里程碑。

KOSTAIVE^®的Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期临床研究数据显示，KOSTAIVE^®的疗效以及耐受性得到了证实，并且与传统mRNA COVID-19疫苗相比，KOSTAIVE^®具有更强的免疫原性。对KOSTAIVE^®加强剂量的进一步研究表明，其加强剂量对年轻和老年人群的多种SARS-CoV-2毒株具有长达12个月的优越抗体持久性，免疫原性表现亦优于相同的mRNA对照疫苗。

 

saRNA技术的核心在于其携带的RNA聚合酶基因，可在细胞内自我复制，以极低剂量实现高效、持久的蛋白质表达，这一特性不仅降低了生产成本，还减少了频繁接种的需求。因saRNA高效表达和低剂量的优势，使得它在传染病防控、肿瘤治疗和罕见病基因治疗领域中备受关注。欧盟此次批准或加速saRNA技术向肿瘤免疫、蛋白质替代等治疗领域扩展，成为基因治疗创新的关键驱动力。

 

云舟生物为广大科研院校、生物制药企业和CRO公司提供IVT saRNA（自复制mRNA） 载体构建服务，可根据客户的个性化需求制备100 bp~3600 bp插入序列的saRNA。云舟生物目前使用基于甲病毒开发的saRNA系统，也可以结合黄病毒（flaviviruses）等其它病毒开发saRNA。如下图所示，与传统的mRNA一样，saRNA包含5 '帽，5' 和3' 非翻译区（UTR），以及poly(A)尾巴；不同于mRNA的是，saRNA包含非结构蛋白（nsP）基因和亚基因组启动子（SGP）。

 

 

云舟生物IVT saRNA定制服务采用经验证的载体骨架系统，结合基因序列优化策略，通过核苷酸修饰技术显著降低免疫原性。服务特色包括：

•  动态多聚腺苷酸尾设计（35-120 nt poly(A)可基于客户需求调整）。

• 长效表达：自研第二代骨架使翻译效率较常规saRNA延长表达时间，显示目的蛋白表达超长30 天持续表达。

相较于传统mRNA技术，saRNA在体内的表达效率更高、时间更长，真正实现高纯度、低用量、高表达。

 

现推出EGFP IVT saRNA (m5C)试用装免费申领，数量有限，先到先得。欢迎咨询~

 

亮点1：验证有效的5’UTR、nsP、SGP、Kozak、3’UTR和poly(A)尾

优化亚基因组启动子（SGP）可提高saRNA的峰值表达。将含有野生型或优化SGP的HiExpress FLuc saRNA转染HEK293T细胞，并在转染后24、48和72 h检测FLuc活性。

 

亮点2：免费密码子优化，提高GOI表达水平

通过对目标基因（结构蛋白）序列的优化提高了GOI的整体表达水平。然而，对非结构蛋白的优化不利于表达水平，这表明保留非结构蛋白原始序列的重要性。

 

 

亮点3：碱基优化，提高saRNA稳定性，降低免疫原性

使用修饰核糖核苷酸合成的自我扩增RNA （saRNA）的体内表达。

（A）每只小鼠肌肉注射5 µg由n1 -甲基假尿嘧啶（m1Ψ）或5-甲基胞嘧啶（m5C）制备的HiExpress FLuc saRNA-LNP。

（B）在24 h时采集血清，进行TNF-α和IL-6的定量检测。

 

 

亮点4：5款A尾骨架随心选

35 nt consecutive poly(A)

70 nt consecutive poly(A)

100 nt consecutive poly(A)

110 nt segmented poly(A)

120 nt consecutive poly(A)

 

关于poly(A)尾长度表达效果的数据显示如下：

【in vitro实验结果】 72 h内，100 nt poly(A) 展现最优异表现，其次为70 nt poly(A)，依次为100 nt poly(A) > 70 nt poly(A) > 120 nt poly(A) > 110 nt poly(A) > 35 nt poly(A)。

【in vivo实验结果】 11 d内，100 nt poly(A) 和120 nt poly(A)展现最优异表现，其次为70 nt poly(A)，依次为120 nt poly(A) ≈ 100 nt poly(A) > 70 nt poly(A) > 110 nt poly(A) > 35 nt poly(A)。

 

结合客户现有需求，一般35 nt能满足大部分客户的基本实验需要，因此，网页上常用35 nt poly(A)。

详情请阅如下:

Poly(A) Tail Integrity

我们构建了不同长度poly(A)尾的高斯荧光素酶（GLuc） IVT saRNA载体，用凝胶电泳分别验证了整个saRNA及其poly(A)区的完整性。

 

Poly(A) Tail Expression Effect

（A）具有不同 poly(A) 尾的高斯荧光素酶 (GLuc) IVT saRNA 的体外表达 。

（B）具有不同 poly(A) 尾的萤火虫荧光素酶 (FLuc) IVT saRNA 的体内表达 。

 

亮点5：超高纯度，低用量实现高表达

与mRNA相比，saRNA在体内的表达时间延长。10 µg萤火虫荧光素酶saRNA在小鼠肌内注射8天后仍能检测到其表达。然而，在48 h时，30 µg mRNA的表达不再被检测到。

 

亮点6：云舟自研第二代saRNA，超长30 天持续表达

通过免疫调节剂的共表达或顺式表达增强saRNA的表达效果。

左：共表达，将IVT EGFP saRNA与免疫调节剂mRNA、对照非编码（NC） RNA共转染或单独转染至HEK293T细胞。共表达免疫调节剂的EGFP saRNA表达至转染后24 d。

右：顺式表达，将顺式表达免疫调节剂的IVT EGFP saRNA转染到HEK293T细胞, 检测EGFP表达至转染后30 d 。

结果表明，云舟生物的新一代的IVT EGFP saRNA产品在体外培养的细胞内可持续表达至30 d。